Choo-Choo Cloning Kit

Popis

Kit Choo-Choo Cloning od společnosti MCLAB je vysoce účinnný kit pro přímé a rychlé klonování PCR produktů bez dalších kroků jako je ligace a restrikce. Pomocí tohoto kitu je možné klonovat PCR fragment do linearizovaného vektoru na jakémkoliv místě jednoduchou 45 minut dlouhou inkubací na ledu (konce DNA fragmentu jsou přesně fúzovány do vektoru s 6-20 bp překrývajícími se homologními sekvencemi. Celý systém je velmi robustní a umožňuje sestavit a naklonovat až 8 fragmentů do jednoho vektoru (až 10 kb v jednom kroku). Vysoká účinnost zaručuje 98-100 % pozitivních kolonií.

Průběh reakce

Funkce

Kit Choo-Choo Cloning funguje na bázi pantentovaných enzymových systémů. Nejsou zde nutné oddělené kroky ligace, restrikčního štěpení či příprava tupých konců. Jakékoliv další nechtěné báze lze odstranit až z finálního konstruktu. Linearizovaný vektor může být generován pomocí PCR nebo restrikčního štěpení. Pro tvorbu PCR amplikonů lze použít Taq nebo jakoukoliv jinou polymerázu s vysokou přesností. Přidání adenosinu na konec amplikonu použitím Taq polymerázy není nutné a nemá na účinnost samotného klonování žádný vliv. Pokud byl PCR produkt amplifikován z plasmidového templátu, je nutné jeho přečištění na gelu.

Aplikace

Kompatibilní se syntézou genů

Kompatibilní s připojením adaptoru, linkeru a tagu před nebo po vložení

Komponenty

Choo-Choo Cloning kity jsou dostupné v různých šaržích dle množství reakcí (10, 20, 100 a 96 reakcí).

Doporučené skladovací podmínky

Skladujte Box 1 at -20°C.

Skladujte Box 2 at -80°C.