Benzonázová endonukleáza

Popis

Benzonázovou endonukleázu (původ Serratia marcescens) lze použít k degradaci všech forem DNA a RNA (jednovláknové, dvouvláknové, lineární i cirkulární). Tento enzym tvořící dimer s dvěma dusilfidickými vazbami o molekulové hmotnosti 30 kD nemá proteolytickou aktivitu. Optimální pH pro aktivitu enzymu je 8.0-9.2. Nukleové kyseliny kompletně štěpí za vzniku 3-5 bp dlouhých nukleotidů zakončených 5'-monofosfátem, což je ideální pro odstranění nukleových kyselin z rekombinantních proteinů a pro další aplikace, kde je třeba nukleové kyseliny úplně rozštěpit. Tnto enzym také snížuje viskozitu v proteinových extraktech a zabraňuje shlukování buněk. Předběžná úprava vzorku proteinu zlepšuje jeho rozlišení na 2D gelové elektroforéze díky odstranění navázaných nukleových kyselin.

Funkce

Snadná manipulace, úspora času

Cenově výhodnější

Žádná typická proteázová aktivita

Stabilní kvalita produktu

Vysoká čistota, nízké znečištění

Použitelné při čištění více než 2 000 proteinů

Vhodné pro purifikaci rekombinantní protilátky

Vhodné pro purifikaci vakcín

Aplikace

Štěpí nativní nebo tepelně denaturovanou DNA a RNA.

Příprava bílkovin v mikrokalometrických experimentech.

Snížení shlukování buněk během přípravy směsí chimérických buněk.

Příprava jaderných extraktů štěpením DNA a uvolňováním jaderných proteinů úzce spojených s DNA.

Odstranění nukleové kyseliny ze vzorků proteinů.

Definice jednotky
Jedna jednotka štěpí sonikovanou DNA lososích spermií na kyselinou rozpustné oligonukleotidy ekvivalentní AA260 1.0 za 30 minut při pH 8.0 při 37 °C (reakční objem 2.625 ml).

Čistota
Více než 95% (stanoveno metodou SDS-PAGE)

Podmínky skladování
50% glycerol, 20 mM Tris HCl - pH 8.0, 2 mM MgCl2, 20 mM NaCl