DpnI

Zdroj: Diplococcus pneumoniae

5′-G A T C- 3′
3′-C T A G- 5′

Reakční teplota: 37 °C

Prototyp: DpnI

Inaktivační teplota (20 min): 80 °C

Reakční pufr:

1x ONE buffer

Definice jednotky: Jedna jednotka je množství enzymu potřebné k úplnému rozštěpení 1 µg pBR322 dam metylované DNA za 1 hodinu. Celkový reakční objem je 50 ul.

Poznámky:

DpnI štěpí pouze methylovaná místa GATC

Při použití jiného než optimálního pufru (ONE Buffer) může být pro dosažení úplného štěpení nutné přidat více enzymu.

Po standardní místně cílené mutagenezi doporučujeme pro dosažení úplného štěpení methylovaného templátu přidat 10 U enzymu (celkový reakční objem je 50 µl).

Podmínky skladování: Skladujte při –20 °C.

Kontrola kvality:

Všechny enzymy jsou testovány na kontaminaci endonukleázou, 3'-exonukleázou a také na nespecifické aktivity jedno- a dvouřetězcové DNázy.