Pfu DNA Polymerase

Pfu DNA polymeráza je vysoce přesná a termostabilní DNA polymeráza izolovaná z Pyrococcus furiosus. Enzym katalyzuje polymeraci nukleotidu při teplotách 72-75°C ve směru 5'->3'. a také 3'->5' exonukleázovou aktivitu (proofreading), která koriguje chyby v inkorporaci nukleotidů.

Hlavní rozdíl mezi Pfu a jinými alternativami je ten, že Pfu má vynikající termostabilitu a opravné vlastnosti. Na rozdíl od Taq DNA polymerázy má Pfu DNA polymeráza také opravnou aktivitu 3'->5' exonukleázy, což vede k amplifikaci PCR produktů s méně chybami než PCR fragmenty, které jsou generované klasickou Taq. Vznikající PCR fragmenty mají tupé konce a díky svým vlastnostem je vhodná pro PCR a primer extension reakce, které vyžadují vysokou přesnost replikace

Pfu DNA polymeráza je účinná pro techniky, které vyžadují vysoce přesnou syntézu DNA, ale může být také použita ve spojení s Taq polymerázou k získání věrnosti Pfu s rychlostí aktivity Taq polymerázy.

replikace.

Enzym je dodáván v koncentraci 2,5 U/µl a součástí balení je i 10X reakční pufr obsahující 20mM MgSO₄.