Cas13a (CRISPR asociovaný protein 13a)

Popis

Adaptivní imunitní systém nalezený u prokaryot využívá CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) a proteiny s ním asociované (Cas) ke štěpení cizího genetického materiálu. Cas13a (dříve C2c2) je součástí systému typu VI CRISPR-Cas. Tato nukleáza má stejnou funkci jako Cas9, k čemuž využívá vodící RNA dlouhou přibližně 64 nukleotidů, v níž je zakódovaná sekvence sloužící ke specifickému navázání na cílovou oblast (komplementárně pomocí spaceru dlouhého 28 nukleotidů). Cas13a štěpí pre-crRNA za vzniku zralého komplexx Cas13a-crRNA.

Kromě programovatelné RNázové aktivyty vykazují všechny nukleázy Cas13 vedlejší aktivitu po rozpoznání a štěpení cílové sekvence transkriptu, která vede k nespecifické degradaci jakýchkoliv dalších blízkých transkriptů nehledě na komplementaritu se spacerem. Schopnost Cas13 štěpit RNA na bázi rozpoznání konkrétní sekvence RNA umožňuje detekovat RNA a má potenciál využití v diagnostice.

Aplikace

Knockdown cílové RNA

RNA editování

Detekce nukleových kyselin

Zdroj

E. coli

Organismus

Leptotrichia wadeii (strain F0279)

UniProt

U2PSH1

Molekulová hmotnost

Zralý rekombinantní protein Cas13a má velikost 143.7 kDa a obsahuje 1182 aminokyselin.

Čistota

Více než 95 % (dle SDS-PAGE)

Doporučené skladovací podmínky

-20 °C (vyhněte se častým cyklům zmrazení a rozmrazení)

Cas13 skladovací pufr

0.3 M NaCl, 20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% Glycerol

10X Cas13 Reaction Buffer

200 mM HEPES, 50 mM MgCl₂, 1 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 6.5

10X Cas13 sherlock reaction buffer (požadován)

200 mM HEPES, 90 mM MgCl₂, pH 6.8

Nabídka

Název	Katalogové číslo	Popis
Cas13a	CAS13a-100	100 μg,1 mg/ml
Cas13a	CAS13a-200	1 mg,1 mg/ml
Cas13a	CAS13a-300	100 mg,10 mg/ml