Golden Gate Ligase

Popis:

Golden Gate Ligase je rekombinantní enzym určený k efektivnímu spojování fragmentů DNA s kohezivními (sticky) i tupými (blunt) konci. Výrobce ho označuje za enzym prémiové kvality. Obsahuje zvýšené množství aktivního enzymu a součástí balení je roztok 10x Start solution, který podle výrobce umožňuje účinnou ligaci i při nízkých koncentracích substrátu nebo u konců DNA, které se obtížně spojují. Je navržen mimo jiné pro klonování technikou Golden Gate Assembly, která umožňuje současné klonování více fragmentů DNA najednou. To podle výrobce zkracuje pracovní postup a zvyšuje efektivitu celého procesu. Podle výrobce nabízí vyšší účinnost ligace i v náročných podmínkách, široké využití ve většině klonovacích protokolů a stabilní, reprodukovatelné výsledky

Vlastnosti:

• Koncentrace enzymu 5 U/µl.

• Rekombinantní enzym prémiové kvality.

• Účinné spojování DNA s lepivými i tupými konci.

• Vysoká účinnost ligace i za náročnějších podmínek.

• Široká využitelnost v různých klonovacích protokolech.

• Stabilní a reprodukovatelné výsledky.

• Skladování při −20 °C.

• Pouze pro výzkumné účely.

Použití:

Golden Gate Ligase je určena pro různé aplikace molekulární biologie, zejména pro:

• Golden Gate Assembly: současné spojování a klonování více fragmentů DNA.

• Klasické klonování DNA: spojování fragmentů s lepivými nebo tupými konci za použití restrikčních enzymů.

• Přípravu sekvenačních knihoven: ligaci adaptérů při přípravě DNA pro sekvenování.

Při metodě Golden Gate Assembly se enzym používá společně s vhodným restrikčním enzymem typu IIS a jeho odpovídajícím reakčním pufrem. Konkrétní enzym a pufr se vybírají podle návrhu DNA konstruktu.

Obsah balení:

• Golden Gate Ligase.

• 10× Start roztok.