Recombinant Proteinase K, solution

Popis:

Proteináza K (také známá jako Proteáza K, Endopeptidáza K, Peptidáza K nebo Tritirachium Alkaline Phosphatase) (EC 3.4.21.64) je nespecifická, širokospektrální serinová proteáza izolovaná z saprofytické houby Tritirachium album. Není aktivována kovovými ionty, chelatačními činidly (např. EDTA), sulfhydrylovými činidly ani inhibitory trypsinu nebo chymotrypsinu. Enzym je stabilní v širokém rozmezí pH (4–12,5), s optimální aktivitou při pH 6,5–9,5. Aktivitu lze stimulovat přidáním denaturačních činidel, jako je SDS a močovina. Optimální teplota pro aktivitu proteinázy K je 65°C, kde je dvanáctkrát aktivnější než při 25°C. Při teplotách nad 65°C dochází k rychlé denaturaci enzymu.

Roztok Proteinase K je optimalizovaný roztok o koncentraci 20 mg/ml. Specifická aktivita je > 30 jednotek/mg při 37 °C. Použité pufrovací podmínky zajišťují, že enzym si zachovává svou plnou aktivitu a poskytují pohodlí pro výzkumníky. Roztok Proteinase K je stabilní po dobu jednoho roku, pokud je správně skladován.

Aplikace:
Proteináza K se používá k rychlé inaktivaci endogenních nukleáz, jako jsou RNázy a DNázy, při izolaci RNA nebo DNA z tkání a buněčných linií, například z epitelových buněk děložní sliznice skotu pro extrakci herpesvirové DNA a extrakci virové RNA z nosních výtěrů. Tento enzym může být také použit jako součást fáze lock a přímého PCR lysis pufru pro odstranění nukleáz při přípravě tkáňových řezů pro in situ hybridizaci.

Zdroj:

Saprofytická houba Tritirachium album.

Skladování: 

-20°C

Vyhněte se vícenásobným cyklům zmrazování a rozmrazování.

Skladování při –20°C v nepřítomnosti glycerolu může vést k vysrážení proteinázy K. V roztocích skladovaných při 2°C–8°C po delší dobu může dojít k růstu bakterií. Ca2+ může sloužit jako stabilizátor k potlačení autolýzy.

Definice jednotky:

Jedna jednotka uvolní 1 µmol aminokyselin pozitivních na Folin, měřených jako tyrosin, při 37 °C, pH 7,5, s denaturovaným hovězím hemoglobinem jako substrátem.

Velikost balení:

2 ml (kat.č. PKS-100)

5 ml (kat.č. PKS-200)

10 ml (kat.č. PKS-300)

50 ml (kat.č. PKS-400)