RNase H, Tth

Popis

RNáza H je endoribonukleáza, která štěpí řetězec RNA hybridních molekul RNA/DNA. Tato termostabilní nukleáza vykazuje stejné enzymatické vlastnosti jako RNáza H, E. coli, ale je aktivní při mnohem vyšších teplotách. Má optimální aktivitu nad 65 °C a může být použita při teplotě až 95 °C. Termostabilita enzymu umožňuje jeho použití při teplotách, které poskytují nejvyšší hybridizační přesnost pro specifické DNA/RNA heteroduplexy, což maximalizuje citlivost a selektivitu při minimalizaci pozadí v důsledku nespecifické hybridizace.

Aplikace

Odstranění poly(A) konců mRNA hybridizovaných s poly(dT)
Odstranění mRNA během syntézy druhého řetězce cDNA

Zdroj
Rekombinantní kmen E. coli nesoucí gen RNAse H z teplomilné bakterie Bacillus stearothermophilus HB8

Skladovací pufr

50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 1.0 mM DTT, 0.1 mM EDTA, and 0.1% Triton® X-100 and 50% glycerol

10x RNAse H Buffer:
500 mM Tris-HCl, 750 mM KCl, 30 mM MgCl_2, 100 mM DTT, pH 8.3 @ 25°C

Definice jednotky

Jedna jednotka vede ke kyselé solubilizaci 1 nmolu [3H]-polyadenylové kyseliny v přítomnosti ekvimolární koncentrace kyseliny polythymidylové za 20 minut při 45 ° C.

Doporučené skladovací podmínky: -20 °C