Uracil DNA Glycosylase (UDG)

Opis: Uracyl-DNA glikozydaza katalizuje hydrolizę wiązania N-glikozydycznego pomiędzy uracylem a cukrem, pozostawiając miejsce apurynowe w jedno- lub dwuniciowym DNA zawierającym uracyl. Enzym nie wykazuje mierzalnej aktywności wobec krótkich oligonukleotydów (<6 zasad) ani substratów RNA.

Zastosowania:

1. Kontrola kontaminacji w reakcjach PCR (1)
2. Detekcja polimorfizmów pojedynczych nukleotydów (GMPD) z udziałem glikozylazy (2)
3. Mutageneza skierowana (3)
4. Jako sonda do badań interakcji protein-DNA (4)
5. Genotypowanie SNP (polimorfizmów pojedynczych nukleotydów)
6. Klonowanie produktów PCR (5)
7. Generowanie pojedynczych nici ukończeniowych produktów PCR i cDNA

Źródło: Rekombinowany szczep E. coli zawierający gen Uracil DNA Glycosylase pochodzący z E. coli K-12

Aktywność Specyficzna: 77 000 jednostek/mg

Dostarczane z: Bufor Reakcji UDG 10X Inkubacja przy 37°C

Bufor Reakcji UDG 10X:

• 200 mM Tris-HCl
• 10 mM DTT (ditiotreitol)
• 10 mM EDTA
• pH 8,0 @ 25°C

Dostarczane w:

• 10 mM Tris-HCl
• 50 mM NaCl
• 1 mM DTT
• 0,1 mM EDTA
• 50% glicerolu
• pH 7,5 @ 25°C

Definicja Jednostki: 1 jednostka to ilość enzymu, która katalizuje uwolnienie 1,8 nmol uracylu w ciągu 30 minut z dwuniciowego, trycjowanego DNA zawierającego uracyl, przy 37°C w 1X buforze reakcji UDG.

Warunki Przechowywania Zalecane: -20°C

Referencje:

1. M. C. Longo i in., Zastosowanie uracyl DNA glikozydazy w kontroli kontaminacji w reakcjach łańcuchowej polimeryzacji. Gene. 93, 125-128 (1990).
2. P. Vaughan, T. V. McCarthy, Nowy proces detekcji mutacji z wykorzystaniem uracyl DNA glikozydazy. Nucleic Acids Res. 26, 810-815 (1998).
3. T. A. Kunkel, Szybka i efektywna mutageneza skierowana bez selekcji fenotypowej. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 82, 488-492 (1985).
4. P. R. Devchand i in., Uracyl-DNA glikozydaza jako sonda do badań interakcji protein-DNA. Nucleic Acids Res. 21, 3437-3443 (1993).
5. P. M. Booth i in., Montaż i klonowanie sekwencji kodujących czynniki neurotroficzne bezpośrednio z DNA genomowego przy użyciu reakcji łańcuchowej polimeryzacji i uracyl DNA glikozydazy. Gene. 146, 303-308 (1994).