HoTaq™ DNA Polimeraza jest hot-start Taq DNA Polimerazą chemicznie modyfikowaną z Taq DNA Polimerazy. HoTaq DNA Polimeraza jest dostarczana w nieaktywnej formie i cechuje się znikomą aktywnością enzymatyczną w warunkach pokojowych. Uaktywnia się po 10 minutowym ogrzewaniu w 95ºC. Zapobiega to tworzeniu niechcianych produktów, prowadząc do wysokiej specyficzności PCR reakcji. Polimeraza jest aktywna w kierunku 5'-> 3' DNA polimerazy oraz nie wykazuje aktywności egzonukleazy w kierunku 3'-> 5'. Każda partia HoTaq DNA polimerazy jest testowana w amplifikacji PCR.
Dostarczana wraz z buforem:
10x Taq PCR Bufor (bez dNTP)
Polimeraza zawieszona jest w buforze o składzie:
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
100 mM KCl
0.5% Tween 20
0.1 mM EDTA
1 mM DTT
50% (v/v) glicerol
Źródło:
Oczyszczana ze szczepu E. coli niosącego gen kodujący polimerazę DNA z Thermus aquaticus (jak Taq DNA Polimeraza).
Zalecane warunki przechowywania: -20°C
Zalecane warunki reakcji:
95°C, 10 minut -> (95°C, 10 sekund -> 55°C, 30 sekund ->72°C, 30 sekund) dla 25 cykli.
Definicja jednostki:
Jedną jednostkę enzymu definiuje się jako ilość enzymu, niezbędną do przeprowadzenia reakcji inkorporacji 10 nmoli deoksyrybonukleotydów dNTPs do frakcji zaabsorbowanej na nośniku stałym, w czasie 30 min w temperaturze 75 °C.