BigDye® Terminator 5X Sequencing Buffer

Opis:
The BigDye^® Terminator 5X Sequencing Bufor redukuje koszty sekwencjonowania bez wpływu na dokładność sekwencji lub długość odczytu. Jego system buforujący pozwala na stosowanie mniejszej ilości dye terminatora mix.

Zastosowanie:
sekwencjonowanie DNA
analiza fragmentów

Zalecane warunki przechowywania: : -20°C

Zalecane postępowanie:

Przygotowanie reakcji  (10µl rxn) zgodnie z poniższym:

- Należy dodać dye terminator mix 0.25-0.5µl
- Następnie 5X Sequencing Buffer 2µl
- Następnie matrycę (100-200 ng/µl) 1 µl
- Następnie primer (3 pmol/µl) 1 µl
- Następnie H₂O do 10 µl

Cykle reakcji:

Krok 1: 96°C  3 minut
Krok 2: 96°C  10 minut
Krok 3: 50°C  5 minut
Krok 4: 60°C  2 minut i 30 sekund
(25 do 30 cykli od kroku 2 do kroku 4)
krok 5: 4°C hold

Uwagi:
Inne warunki cykli mogą równie dobrze funkcjonować. Podane wyżej warunki działają dobrze dla prób analizowanych w naszym laboratorium stosując zredukowane objętości oraz zredukowane koncentracje terminator mix.