Opis:
Zestaw do Konstrukcji Biblioteki DNA bez amplifikacji firmy MCLAB to bardzo wydajny zestaw do przygotowywania bibliotek DNA z dwoma końcami lub z użyciem technologii multiplexing do sekwencjonowania o dużej przepustowości. Zestaw umożliwia bezpośrednie przygotowanie bibliotek DNA do analizy sekwencjonowania następnej generacji przy użyciu platform sekwencjonowania Illumina® GAIIxTM, HiSeqTM 2000 i MiSeq®. Dzięki zachowaniu złożoności bibliotek sekwencjonowania, protokół jest szybszy niż standardowa metoda, a dane pokrywają się równomiernie, z mniejszą liczbą zduplikowanych odczytów i mniejszym zniekształceniem PCR w sekwencjonowaniu DNA.
Funkcja:
Najważniejszą funkcją zestawu do konstrukcji biblioteki DNA bez amplifikacji firmy MCLAB jest nasz opatentowany system ligacji. Dzięki metodzie przygotowywania bibliotek bez amplifikacji, przy użyciu dostosowanych adapterów, niewzmocnione i zligowane próbki DNA mogą hybrydyzować bezpośrednio z oligonukleotydami na powierzchni komórki przepływowej. Etap amplifikacji klastrów (zamiast stosowania PCR) wzbogaca komórkę przepływową o w pełni zligowane nici matrycowe, zmniejszając liczbę sekwencji zduplikowanych, poprawiając mapowanie odczytów i wywoływanie polimorfizmów pojedynczego nukleotydu. Biblioteki z końcami sparowanymi są kompatybilne zarówno z komórkami przepływowymi dla odczytów sparowanych, jak i pojedynczych.
Cechy:
Komponenty:
Odczynniki dostarczone w zestawie do konstrukcji biblioteki DNA bez amplifikacji firmy MCLAB są wystarczające do przygotowania bibliotek DNA dla 20 lub 100 próbek do sekwencjonowania następnej generacji kompatybilnej z platformą Illumina®.
Zestaw do Konstrukcji Biblioteki DNA bez Amplifikacji (20 reakcji):
Mieszanina enzymów do naprawy końców: 110 µl
Bufor Naprawy Końców10x: 110 µl
Enzym do Adenylacji:90 µl
Bufor Adenylacji 10x: 90 µl
Mieszanina adapterów DNA: 25 µl
Mieszanina enzymów do Ligacji DNA: 90 µl
Bufor Ligacji DNA 10x: 90 µl
Zestaw do Konstrukcji Biblioteki DNA bez Amplifikacji (100 reakcji):
Mieszanina enzymów do naprawy końców: 550 µl
Bufor Naprawy Końców 10x: 550 µl
Enzym do Adenylacji: 450 µl
Bufor Adenylacji 10x: 450 µl
Mieszanka Adapterów DNA: 125 µl
Mieszanka Enzymów do Ligacji DNA: 450 µl
Bufor Ligacji DNA 10x: 450 µl
Zalecane Warunki Przechowywania: -20°C.