T4 DNA Ligase

Opis:

Ligaza DNA T4 katalizuje tworzenie wiązania fosfodiestrowego między sąsiadującymi końcami 5'-fosforanowym a 3'-hydroksylowym w dwuniciowym DNA lub RNA, używając ATP jako kofaktora.

Rysunek. Ligacja fragmentów λ DNA/Hind III analizowane przez elektroforezę agarozową. Wydajność ligazy DNA T4 od MCLAB i innego dostawcy została porównana w identycznych mieszaninach reakcyjnych w 37°C przez 30 minut. Próbka negatywna została przeprowadzona równolegle bez ligazy.

Zastosowanie:

• Klonowanie fragmentów ograniczeń
• Łączenie linkerów i adapterów z zakończonymi sterylnie fragmentami DNA

Źródło: Rekombinowany szczep E. coli przenoszący sklonowany gen ligazy DNA T4.

Dostarczony w:

• 10 mM Tris-HCl
• 50 mM KCl
• 1 mM DTT
• 0.1 mM EDTA
• 50% Glicerol
• pH 7.4 @ 25°C

Dostarczony z:

• 10x Bufor T4 DNA Ligase
• 500 mM Tris-HCl
• 100 mM MgCl2
• 50 mM DTT
• 10 mM ATP
• pH 7.6 @ 25°C

Definicja Jednostki:

Jednostka Weissa enzymu katalizuje przekształcenie 1 nmola [32PPi] w formę adsorbowalną przez Norit w ciągu 20 minut w 37°C. Aktywność enzymu jest oznaczana w następującej mieszance: 66 mM Tris-HCl (pH 7.6), 6.6 mM MgCl2, 0.066 mM ATP, 10 mM DTT, 3.3 µM [32PPi].

Jednostka Weissa jest równa około 67 jednostkom kohezyjnym (CEU). Lub 1000 CEU = 15 jednostkom Weissa.

Specyficzna aktywność: 300 jednostek/µg

Zalecane warunki przechowywania: -20°C