Pfu DNA Polymerase

Description:

Pfu DNA polymeráza je vysoce přesná a termostabilní DNA polymeráza izolovaná z Pyrococcus furiosus. Enzym katalyzuje polymeraci nukleotidu při teplotách 72-75°C ve směru 5'->3'. a také 3'->5' exonukleázovou aktivitu (proofreading), která koriguje chyby v inkorporaci nukleotidů.

Hlavní rozdíl mezi Pfu a jinými alternativami je ten, že Pfu má vynikající termostabilitu a opravné vlastnosti. Na rozdíl od Taq DNA polymerázy má Pfu DNA polymeráza také opravnou aktivitu 3'->5' exonukleázy, což vede k amplifikaci PCR produktů s méně chybami než PCR fragmenty, které jsou generované klasickou Taq. Vznikající PCR fragmenty mají tupé konce a díky svým vlastnostem je vhodná pro PCR a primer extension reakce, které vyžadují vysokou přesnost replikace

Pfu DNA polymeráza je účinná pro techniky, které vyžadují vysoce přesnou syntézu DNA, ale může být také použita ve spojení s Taq polymerázou k získání věrnosti Pfu s rychlostí aktivity Taq polymerázy.

replikace.

Enzym je dodáván v koncentraci 2,5 U/µl a součástí balení je i 10X reakční pufr obsahující 20mM MgSO₄.

Application:
- High-fidelity PCR and primer-extension reactions
- Generation of PCR products for cloning and expression
- PCR cloning and blunt-end amplification product generation
- RT-PCR for cDNA cloning and expression
- Site-directed mutagenesis
- Blunt-end PCR cloning

Source:
Thermostable DNA polymerase from hyperthermophilic archaeon pyrococcus furiosus.

Supplied With:
10x Pfu Reaction Buffer (with dNTPs)
 

10x Pfu Reaction Buffer (with dNTPs)  
200mM Tn3 pH 8.8
20 mM MgSO₄
100 mM KCl
100 mM (NH₄)₂SO₄
1% Triton
1 mg/ml BSA
2 mM dNTP

Supplied In: 
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
40 mM NaCl
0.1 mM EDTA
1 mM DTT
50% (v/v) glycerol

Heat Inactivation:
95% inactive after 1-hour incubation at 98°C

Recommended Storage Condition: -20ºC