MC Cloning 5’/3’-RACE Kit

Popis

Kit MC Cloning 5'/3' RACE od společnosti MCLAB poskytuje vhodný způsob pro rychlou amplifikaci konců cDNA (RACE) včetně optimalizovaných primerů pro klonování jakéhokoliv genu. Součástí kitu je patentovaná reverzní transkriptáza SmartRT, která byla speciálně vyvinuta úpravou reverzní transkriptázy M-MLV RT (reverzní transkriptáza viru myší leukémie) pro zvýšenou termostabilitu, vylepšenou schopnost cDNA syntézy a sníženou aktivitu RNázy H. Tento enzym má rovněž terminální transferázovou aktivitu, jež pomocí metody SMART (Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript) umožňuje syntetizovat kompletní sekvenci cDNA. Takto vzniklou cDNA lze rovnou amplifikovat pomocí I-5™ 2X High-Fidelity Master Mixu od stejného výrobce. S několika dalšími nukleotidy přidanými na 3' konec a složkou 5' SMART universal oligo připojenou na 5' konec prvního řetězce cDNA může sloužit jako prodloužený templát pro reverzní transkripci, která má za následek tvorbu RNA se specifickou sekvencí 5' SMART oligo.

Funkce

Specifická technika obohacování cDNA v plné délce
Optimalizovaná sada primerů pro sekvenování celé sekvence cDNA
Zjednodušený protokol bez kroku ligace adaptéru na 5' konec

Aplikace
Generování cDNA v celé délce
Studie struktury a exprese molekul RNA
Izolace a charakterizace 5' nebo 3' konců z RNA s nízkým počtem kopií
Amplifikace a další klonování vzácných mRNA
Použití ve spojení s metodami exon-trapping

Komponenty
1.

Doporučené skladovací podmínky: -20 °C

2. 5' SMART Universal Oligo, 10 µl/20 µl.

Doporučené skladovací podmínky: -80 °C