IDA agaróza pro fosfoproteiny a fosfopeptidy

Popis
Detaily produktu

Vlastnosti

Četné kombinace ligandů a kovových iontů
Vysoká afinita a velká kapacita
Minimální nespecifická vazba a vynikající čistota
Dlouhá oddalující raménka a minimální sterické překážky
Nízké uvolňování iontů ze sorbentu a jeho vynikající stabilita
Zaručen vysoký výkon i po opakovaném použití

Aplikace

Čištění fosfoproteinů a fosfopeptidů

Výměna stávající NTA nebo IDA agarózy za novou
Čištění za nativních i denaturačních podmínek
Vhodné pro malé proteiny, velké proteinové komplexy a proteiny s nízkou expresí

Purifikace fosfoproteinů a fosfopeptidů

Imobilizované ionty Al³⁺, Ga³⁺ nebo Fe³⁺patří mezi nejrozšířenější ionty pro selekc fosfopeptidů ze složitých proteolyticky štěpených směsí obsahujících jak fosforylované, tak nefosforylované složky. Nejčastěji používanými ligandy jsou NTA a IDA. V závislosti na identitě proteinů, profilu nečistot a podmínkách purifikace mohou různé kombinace iontů a ligandů dosáhnout různých výsledků čištění.

Jak pro metodu IMAC vybrat různé ligandy a kovové ionty?

NTA a IDA patří mezi dva nejpoužívanější ligandy. NTA je čtyřmocný ligand a je tedy silnější než trojmocný IDA. Obecně NTA poskytuje vyšší vazebnou specificitu a nižší vmíru uvolňování kovových iontů, zatímco IDA vykazuje méně specifickou vazbu a zvýšené uvolňování kovových iontů. IDA může mít vyšší hustotu nasycení kovových iontů a obvykle vyžaduje mnohem nižší koncentraci imidazolu v eluentu.

Výběr optimální kombinace ligandu a kovového iontu závisí na mnoha faktorech, proto je nejlepším přístupem vyzkoušet různé kombinace a nechat rozhodnout vaše proteiny. Vysoce výkonné pryskyřice a cartridge FastSep™ nabízejí mnoho kombinací pro různé potřeby čištění. Jsou založeny na zesítěných 6% kuličkách agarosy, které mají speciální strukturální vlastnosti, jež vedou k vynikajícím průtokovým vlastnostem, nízkému protitlaku a struktuře s otevřenými póry. Díky těmto vlastnostem umožňují provoz při velmi vysokém stupni průtoku, což má za následek zvýšenou propustnost a rychlé čištění kolony mezi chromatografickými cykly.

Nabídka

Název	Katalogové číslo	Popis (každá kombinace je 50% suspenze)
Al-IDA pryskyřice	ALIDA-25	25ml hliníkem nabitá IDA pryskyřice (50ml celkový objem)
Al-IDA pryskyřice	ALIDA-100	100ml hliníkem nabitá IDA pryskyřice (200ml celkový objem)
Al-IDA pryskyřice	ALIDA-500	500ml hliníkem nabitá IDA pryskyřice (1000ml celkový objem)
Ga-IDA pryskyřice	GAIDA-25	25ml galiem nabitá IDA pryskyřice (50ml celkový objem)
Ga-IDA pryskyřice	GAIDA-100	100ml galiem nabitá IDA pryskyřice (200ml celkový objem)
Ga-IDA pryskyřice	GAIDA-500	500ml galiem nabitá IDA pryskyřice (1000ml celkový objem)
Fe-IDA pryskyřice	FEIDA-25	25ml železem nabitá IDA pryskyřice (50ml celkový objem)
Fe-IDA pryskyřice	FEIDA-100	100ml železem nabitá IDA pryskyřice (200ml celkový objem)
Fe-IDA pryskyřice	FEIDA-500	500ml železem nabitá IDA pryskyřice (1000ml celkový objem)
XX-IDA pryskyřice	XXIDA-OEM	Jakýkoli objem a ion

Specifikace

Chromatography technique	Histidine-tagged protein purification
Matrix	Highly cross-linked 6% beaded agarose
Active group	Al³⁺, Ga³⁺ or Fe³⁺ charged Iminodiacetic Acid (IDA)
Active group density	>40 umol/ml drained medium
Binding capacity	>40 mg/ml drained medium
Spacer	12 atom stable and uncharged ether hydrophilic linkage
Bead geometry & size	Spherical 50 to 150 um
Bead mean diameter d50v	90 um
Linear flow velocity	<75 cm/h at 25 °C, HR 16/10 column, 5 cm bed height
Recommended linear flow rate	<30 cm/h
Pressure/flow specification	Base matrix 100-200 cm/h, pressure drop cm H2O/bed height = 15, bed height 10 cm, 5 cm i.d.
1ml Cartridge bed dimensions	7×25 mm
1ml Cartridge bed height	25 mm
1ml Cartridge bed volume	1 ml
1ml Cartridge column I.D	7 mm
5ml Cartridge bed dimensions	16×25 mm
5ml Cartridge bed height	25 mm
5ml Cartridge bed volume	5 ml
5ml Cartridge column I.D	16 mm
Maximum cartridge flow rate	5 ml/min (1 ml cartridge) or 20 ml/min (5ml cartridge)
Recommended cartridge flow rate	1 ml/min (1 ml cartridge) or 5 ml/min (5 ml cartridge)
Maximum pressure during operation	5 bar [0.5 MPa] (70 psi)
pH Stability working range	3 to 13
pH Stability cleaning in place (cip)	2 to 14
Chemical stability	Stable to commonly used aqueous solutions. Can be used with non-ionic detergents, denaturing solvents, e.g. 8 M urea and 6 M guanidine hydrochloride, Stable in organic solvents, e.g. 50% methylformamide and 50% dioxane.
Storage	2 to 8 °C