T4 DNA Polymerase

Opis: Polimeraza DNA T4 katalizuje przedłużanie zlokalizowanej na matrycy DNA sekwencji starterowej w kierunku 5' -> 3'. Ten enzym wykazuje silną aktywność egzonukleazy w kierunku 3' -> 5', jednocześnie nie posiadając żadnej wrodzonej aktywności egzonukleazy w kierunku 5' -> 3' ani funkcji przemieszczania się wzdłuż łańcucha.

Specyficzna aktywność: 5 555 jednostek/mg

Zastosowania:

• Usuwanie zakończeń 3'-końcowych dla uzyskania końców sterylnych
• Wypełnianie zakończeń 5'-końcowych dla uzyskania końców sterylnych
• Usuwanie pojedynczych nici do subklonowania
• Synteza drugiej nici w mutagenezie ukierunkowanej na miejsce
• Oznaczanie sondy przy użyciu syntezy zastępczej

Źródło: Oczyszczona z szczepu E. coli, który ekspresuje rekombinowany gen polimerazy DNA T4.

Dostarczona w:

• 100 mM KPO4
• 1.0 mM DTT
• 0.1 mM EDTA
• 50% Glicerol
• pH 6.5 @ 25°C

Dostarczona z: Buforem 10x Blue Buffer

Bufor 10x Blue Buffer:

• 500 mM NaCl
• 100 mM Tris-HCl
• 100 mM MgCl2
• 10 mM DTT
• pH 7.9 @ 25°C

Definicja Jednostki: Jednostka jest zdefiniowana jako ilość enzymu, która wbuduje 10 nmol dNTP w materiał kwasoodporny w ciągu 30 minut w 37°C.

Zalecane warunki przechowywania: -20ºC

Referencje:

1. Tabor, S. i Struhl, K. (1989) W: DNA-Dependent DNA Polymerases. F. M. Ausebel, R. Brent, R. E. Kingston, D. D. Moore, J. G. Seidman, J. A. Smith i K. Struhl (Eds.), Current Protocols in Molecular Biology, pp. 3.5.10-3.5.12. 2. Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2nd Ed.), 5.44-5.47.
2. Dale, R., McClure, B. and Houchins, J. (1985) Plasmid, 13, 31-40.
3. Kunkel, T.A., Roberts, J.D. and Zakour, R.A. (1987) R. Wu and L. Grossman (Eds.), Methods Enzymol., 154, pp. 367-382. San Diego: Academic Press.
4. Panet, A., van de Sande, J.H., Loewen, P.C. and Khorana, H.G. (1973) Biochemistry, 12, 5045-5050.