2X HotStart PCR Master Mix

Opis:
2X HotStart PCR Master Mix to gotowa 2× mieszanina PCR zawierająca polimerazę HoTaq DNA, bufor reakcyjny, MgCl₂ oraz dNTPs. Przeznaczona jest do rutynowego PCR, genotypowania oraz aplikacji multiplex. Umożliwia proste przygotowanie reakcji poprzez dodanie matrycy DNA, starterów i wody. Polimeraza HoTaq jest enzymem typu hot-start, nieaktywnym w temperaturze pokojowej i aktywowanym w 95 °C.

Właściwości:

• gotowa 2× mieszanina PCR
• zawiera HoTaq DNA polymerase, dNTP, MgCl₂ i bufor
• system hot-start redukujący amplifikację nieswoistą
• do rutynowego i multiplex PCR
• minimalna potrzeba optymalizacji
• wysoka powtarzalność wyników

Protokół PCR (workflow):

1. zmieszać matrycę DNA i startery
2. dodać wodę do połowy końcowej objętości reakcji
3. dodać równą objętość 2× master mixu
4. warunki PCR:
   • denaturacja wstępna: 95 °C (10 min aktywacja HoTaq)
   • denaturacja: 95 °C
   • annealing: ~Tm − ok. 2 °C
   • elongacja: 72 °C (ok. 30 s/kb)
   • końcowa elongacja: 72 °C

Przechowywanie:

• przechowywać w −20 °C

Zastosowanie:

• rutinní PCR
• genotypowanie
• multiplex PCR
• amplifikacja DNA
• zastosowania biologii molekularnej